Efeitos de anticolinesterásicos em um modelo de neurodegeneração induzido por crises convulsivas provocadas por ácido caínico em peixes-zebra: ensaio pré-clínico

Abstract

A neurodegeneração pela neuroinflamação decorrente de um episódio de crise convulsiva é comprometedora. Incluem-se entre os danos: morte neural, mudanças nas funções gliais e níveis de neurotransmissores. Na convulsão, há um desequilíbrio entre a atividade glutamatérgica (excitatória) e GABAérgica (inibitória) na rede neuronal. As crises podem ser mimetizadas em modelos animais por meio da administração de ácido caínico (AC), um agonista dos receptores ionotrópicos de cainato. Diante deste cenário de neuroinflamação, apresentam-se a galantamina sintética e o extrato de Hippeastrum papilio (Amaryllidaceae) como potenciais estratégias neuroprotetoras nesse modelo. O extrato obtido é composto de diversos alcaloides de Amaryllidaceae presentes no bulbo de H. papilio, incluindo a galantamina. Ambos os compostos possuem efeito anticolinesterásico. Dessa forma, o presente estudo tem como objetivo geral investigar o potencial neuroprotetor da galantamina sintética e do extrato do bulbo de H. papilio, frente a parâmetros relacionados à neurotransmissão colinérgica e glutamatérgica, e ao estresse oxidativo, em modelo de AC em peixes-zebra. Foram utilizados 541 peixes distribuídos em 6 grupos: I. Grupo Controle (PBS+PBS); II. Grupo AC+PBS; III. Grupo PBS+Gal; IV. Grupo AC+Gal; V. Grupo PBS+Extrato; VI. Grupo AC+Extrato. Os peixes foram condicionados por administração de 10 μL de AC (4 mg/kg) ou PBS, conforme o grupo, de forma intraperitoneal. Então, após 10 h da administração de AC, foi administrado da mesma forma, o extrato (0,05 ng/g), a galantamina (0,05 ng/g) ou o PBS. Nos primeiros 60 min da administração de AC foi analisado o perfil de crise convulsiva de todos os animais para assegurar a indução do modelo. A seguir, os animais foram eutanasiados em dois momentos. O primeiro momento foi no tempo de 12 h após administração de AC com parte dos animais dos grupos experimentais. No segundo momento, 72 h após a administração, foi analisada a atividade locomotora do restante dos animais e, em seguida, foram eutanasiados. Os conteúdos cerebrais dissecados em 12 h foram usados para análises bioquímicas. Nessas análises foi quantificado a captação total de glutamato, a atividade enzimática da AChE, da colina-acetiltransferase e parâmetros de estresse oxidativo (DCFH-DA, Superóxido dismutase [SOD], Catalase, Sulfidrila, glutationa peroxidase [GPx] e glutationa redutase [GR]) em 12 h. Foi averiguado que os grupos PBS+Extrato, e AC+Extrato exibiram aumentos significativos na captação total de glutamato em relação ao grupo Controle e ao grupo AC+PBS. Já na atividade da SOD, os grupos: AC+Gal, PBS+Extrato e AC+Extrato exibiram diminuições significativas em relação ao grupo AC+PBS. As demais análises não apresentaram diferenças significativas. Em conclusão, há evidências de que o período de 12 h após a administração de AC não apresentou uma resposta efetiva frente à estratégia do modelo proposto. No entanto, o extrato com a galantamina apresentou um efeito de modulação dos mecanismos de transporte do glutamato e um mecanismo de defesa antioxidante. Uma vez que não foi observado efeito na AChE ou na ChAT, outros mecanismo podem estar modulando o sistema excitatório. O presente estudo analisou tempos e doses isoladas, sendo necessário para futuros estudos na área, análises em diferentes parâmetros temporais e de administração.