Efeitos do tratamento com ultrassom pulsado de baixa intensidade transcraniano associado as nanopartículas de ouro em um modelo de doença de Alzheimer

Abstract

A Doença de Alzheimer (DA) é uma patologia que se desenvolve de forma progressiva e irreversível. Novas estratégias terapêuticas são necessárias para o tratamento da DA. O ultrassom pulsado de baixa intensidade (UPBI) é uma terapia não invasiva, de baixo custo, que estimula áreas especificas do cérebro. As nanopartículas de ouro (GNPs) são moléculas promissoras no tratamento de doenças neurodegenerativas devido suas propriedades anti-inflamatórias e antioxidantes. O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito do tratamento do UPBI associado as GNPs no aprendizado, memória e neuroinflamação em um modelo animal de DA induzido pela administração do peptídeo β-amilóide (βA1-42) em camundongos. Foram utilizados no total 60 camundongos machos com 90 dias de vida. O peptídeo βA1-42 ou líquido cefalorraquidiano artificial (ACSF) (400 pmol/Μl) foi inoculado intracerebroventricular nos camundongos BalbC, e o tratamento foi iniciado 24 horas após. Os animais receberam o tratamento com GNPs via intranasal (25μg/mL) e UPBI (dose 0.8 W/cm²) com frequência de 1.0 MHz por 17 dias com intervalo de 48 horas. Os animais foram distribuídos em cinco grupos experimentais (n=12): 1-ACSF; 2- βA1–42; 3- βA1–42+UPBI; 4- βA1–42+GNPs; 5- βA1–42+UPBI+GNPs. Nos dias 11º e 12º após inoculação os animais foram submetidos ao teste de campo aberto, no dia 13° ao teste Y maze, e a partir do dia 14° a 18° ao teste do labirinto radial. Logo após os testes comportamentais, no dia 19°, todos os grupos foram eutanasiados para a coleta do córtex pré-frontal, hipocampo, fígado e posteriormente análises bioquímicas e histológicas. Na análise histológica de fígado não foi observado em nenhum dos grupos experimentais a presença de infiltrado inflamatório. Os comportamentos demonstraram que houve danos de aprendizagem e memória nos grupos que receberam o peptídeo βA1-42, exceto no teste de campo aberto. No teste Y maze, apenas os grupos com terapias isoladas reverteram os déficits de memória de curto prazo. Já no teste de labirinto radial, todos os grupos apresentaram reversão dos déficits de memória. Na análise de fatores neurotróficos, no hipocampo e no córtex pré-frontal, todos os grupos tratados tiveram um aumento significativo do fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF) em comparação ao grupo βA1-42. Nas análises de citocinas pró-inflamatórias, no córtex pré-frontal houve uma diminuição das citocinas interleucina 1 beta (IL-1β) e interleucina 6 (IL-6) em todos os grupos tratados em comparação com o grupo βA1-42. No hipocampo, todos os grupos tratados provocaram uma redução significativa nos níveis de fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) e IL-1β em relação ao grupo βA1-42. Além disso, houve um aumento significativo da citocina anti-inflamatória interleucina 10 (IL-10) em todos os grupos em relação ao grupo βA1-42, no hipocampo. Na análise de óxido nítrico (NO), no hipocampo, houve uma diminuição significativa no grupo terapias associadas em relação ao grupo βA1-42, com um aumento significativo da glutationa reduzida (GSH) em todos os grupos tratados em relação ao grupo βA1-42. No córtex pré frontal, o nitrito apresentou redução significativa em todos os grupos tratados em relação ao grupo βA1-42, com concomitante aumento do GSH em todos os grupos em relação ao grupo βA1-42. Na análise de RT-PCR houve um aumento da expressão gênica do fator Nuclear Kappa B (NFĸB) no hipocampo e todos os grupos tratados diminuíram esses achados em comparação ao grupo βA1-42. Na expressão gênica da proteína percursora amilóide (APP), apenas o grupo βA1-42+UPBI demonstrou uma diminuição dessa proteína. Os resultados demonstraram que as terapias isoladas tiveram uma melhor efetividade nos testes comportamentais. No entanto, o grupo associado demonstrou uma tendência a um maior potencial terapêutico e neuroprotetor, quando analisados os parâmetros de comportamento e análises bioquímicas.